小鼠孕酮(PROG)診斷試劑盒(酶聯**法)

(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)

原理

試劑盒中將抗孕酮抗體包被于微孔板上，制備成固相抗體，酶結合物含有用辣根過氧化物酶標記的孕酮抗原。反應過程中，若檢測標本含有孕酮，則與標記抗原競爭固相抗體，形成固相抗體－抗原或固相抗體－標記抗原復合物，并結合在微孔壁表面，洗去多余的標記抗原，再加入酶底物顯色，用1N H2SO4終止酶反應后，在450nm波長下測定吸光度。

試劑盒組成（2-8℃保存）

準備試劑與收集血樣

1. 收集標本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20 ℃或-70 ℃）保存，避免反復凍融。血清、血漿、細胞培養上清可能需要稀釋,請先做預實驗,以確定稀釋倍數。
2. 實驗各組份試劑使用前充分搖勻。
3. 洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）

檢測程序

1. 加樣：每孔依次各加入標準品，待測樣品100ul。
2. 每孔加入酶結合物50ul（空白孔除外），置37 ℃暗處反應60分鐘。
3. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。
4. 每孔加入底物工作液100ul，置37 ℃暗處反應15分鐘。
5. 每孔加入100ul終止液混勻。
6. 30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值

結果計算與判斷

1. 以標準品50、25、10、2.5、0.5 ng/ml為橫坐標取對數，OD值為縱坐標，使用軟件作圖，畫出標準曲線。
2. 根據樣品OD值計算出相應PROG含量。軟件可以向本公司郵件索取。

檢驗方法的局限性

溶血、乳糜血樣本響測定結果。

試劑盒性能

            1. 靈敏度：*小的PROG檢測濃度小于0.3ng/ ml。

2. 特異性：與其他**沒有交叉反應。
3. 重復性：變異系數均小于9.8％。

注意事項

            1. 以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。

2. 洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致**度誤差及OD值錯誤地升高。

            3. 板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。

            4. 本試劑盒宜置4oC冰箱保存。

5. 本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！